气相色谱剖析的重要作用之一是对样品定量。而气相色谱法定量的依据是：组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量剖析办法分为面积归一化法、内标法、外标法、规范曲线法等。大家常常简略傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了。

       以内标法为例，选一与欲测组分邻近但能撤底分离的组分做内标物（当然是样品中没有的组分），然后制造欲测组分和内标物的混合规范溶液，进样得相对校对因子。再将内标物参加欲测组分的样品中，进样后测得欲测组分和内标物的定量参数，用内标法公式核算即可。

       其实，从界说上来区分的话，外标法便是用规范品的峰面积或峰高与其对应的浓度做一条规范曲线,测出样品的峰面积或峰高,在规范曲线上查出其对应的浓度,这常用的一种定量办法；内标法是对应外标法说的，内标法是将必定量的纯物质作内标物，参加到精却称量的试样中，依据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比，来核算被测组分的含量。

      外标法需求用样品和规范品比照，可是有时我们很难保证样品和规范品进的体积是一样的，究竟要有差错，这时分就用内标法，便是在外标法的基础上,在样品和规范品里在参加一种物质，通过参加物质的峰面积或峰高的改变,就能够看出我们规范品和样品进样体积的差别，但一起会引进参加物质的秤量差错。所以一般用外标法来定量,假如进样体积很难掌握，就用内标法，能够消除进样体积的差错。

外标法（规范曲线法、直接比较法）

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首要用欲测组分的规范样品制作规范作业曲线。详细作法是：用规范样品制造成不同浓度的规范系列，在与欲测组分相同的色谱条件下，等体积精却量进样，丈量各峰的峰面积或峰高，用峰面积或峰高对样品浓度制作规范作业曲线，此规范作业曲线应是通过原点的直线。若规范作业曲线不通过原点，说明测定办法存在系统差错。规范作业曲线的斜率即为精却校对因子。

当欲测组分含量改变不大，并已知这一组分的大约含量时，也能够不用制作规范作业曲线，而用单点校对法，即直接比较法定量。单点校对法实际上是运用原点作为规范作业曲线上的另一个点。因此，当办法存在系统差错时（即规范作业曲线不通过原点），单点校对法的差错较大。因此规则，y=ax+b b的值应不大于100%响应值是y的2%。

规范曲线法的长处：制作好规范作业曲线后测定作业就很简略了，核算时可直接从规范作业曲线上读出含量，这对大量样品剖析十分适宜。特别是规范作业曲线制作后能够运用一段时间，在此段时间内可经常用一个规范样品对规范作业曲线进行单点校对，以承认该规范作业曲线是否还可运用。

规范曲线法的缺陷：每次样品剖析的色谱条件（检测器的响应功能，柱温度，活动相流速及组成，进样量，柱效等）很难特别相同，因此简略呈现较大差错。别的，规范作业曲线制作时，一般运用欲测组分的规范样品（或已知精却含量的样品），因此对样品前处理过程中欲测组分的改变无法进行补偿。

内标法

挑选适合的物质作为欲测组分的参比物，定量加到样品中去，依据欲测组分和参比物在检测器上的响应值（峰面积或峰高）之比和参比物参加的量进行定量剖析的办法称为内标法。

内标法的关键是挑选适宜的内标物。内标物应是原样品中不存在的纯物质，该物质的性质应尽或许与欲测组分邻近，不与被测样品起化学反应，一起要能撤底溶于被测样品中。内标物的峰应尽或许挨近欲测组分的峰，或位于几个欲测组分的峰中间，但须与样品中的所有峰不重叠，即撤底分开。

内标法的长处：进样量的改变，色谱条件的细小改变对内标法定量成果的影响不大，特别是在样品前处理（如浓缩、萃取，衍生化等）前参加内标物，然后再进行前处理时，可部分补偿欲测组分在样品前处理时的丢失。若要取得很高精度的成果时，能够参加数种内标物，以进步定量剖析的精度。

内标法的缺陷：挑选适宜的内标物比较困难，内标物的称量要精却，操作较费事。运用内标法定量时要丈量欲测组分和内标物的两个峰的峰面积（或峰高），依据差错叠加原理，内标法定量的差错中，因为峰面积丈量引起的差错是规范曲线法定量的2-2是因为进样量的改变和色谱条件改变引起的差错，内标法比规范曲线法要小许多，所以总的来说，内标法定量比规范曲线法定量的精却度和精蜜度都要好。

规范参加法

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规范参加法实质上是一种特别的内标法，是在挑选不到适宜的内标物时，以欲测组分的纯物质为内标物，参加到待测样品中，然后在相同的色谱条件下，测定参加欲测组分纯物质前后欲测组分的峰面积（或峰高），从而核算欲测组分在样品中的含量的办法。

规范参加法的长处：不需求别的的规范物质作内标物，只需欲测组分的纯物质，进样量不用十分精精，操作简略。若在样品的前处理之前就参加已知精却量的欲测组分，则能够彻底补偿欲测组分在前处理过程中的丢失，是色谱剖析中较常用的定量剖析办法。

规范参加法的缺陷：要求参加欲测组分前后两次色谱测定的色谱条件撤底相同，以保证两次测守时的校对因子撤底相等，不然将引起剖析测定的差错。

挑选内标物有4个要求：

1.内标物应是该试样中不存在的纯物质；

2.它需求撤底溶于试样中，并与试样中各组分的色谱峰能撤底分离；

3.参加内标物的量应挨近于被测组分；

4.色谱峰的方位应与被测组分的色谱峰的方位邻近，或在几个被测组分色谱峰中间。

内标法的长处是测定的成果较为精却，因为通过丈量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行核算的，因而在必定程度上消除了操作条件等的改变所引起的差错。内标法的缺陷是操作程序较为费事，每次剖析时内标物和试样都要精却称量，有时寻觅适宜的内标物也有困难。

外标法简洁，但进样量要求十分精却，要严厉操控在与规范物相同的操作条件下进行，不然形成剖析差错，得不到精却的丈量成果。

内标与外标都是定量的一种办法而已，至于哪一种办法好与欠好不能混为一谈，做不同的剖析，面对着不同的要求，再加上剖析本钱剖析效率等等问题，我想简略而有效进行定量剖析来满意要求才是重要的。

下面用几个比方来说明：

1、以前做过许多医药、农药中间体的芳香族卤代化合物的常量定量剖析，没有自动进样器，用外标法定量，的确重现性与安稳性十分差，成果经常遭到搞合成搭档的质疑。其实，仔细剖析原因不必定便是外标法不适合这种定量剖析，首要我们的试验室仪器和手法是否调整到一种安稳而合理的状况了，比方，衬管是否洁净，玻璃棉的方位是否适宜恰当（能否使样品尽或许的汽化）、汽化温度是否适宜、色谱峰形是否对称（也便是样品与色谱柱健合相是否匹配）、邻近有没有其它色谱峰的干扰、选用什么进样办法（如快速进样仍是热针进样）等等要素的影响都需求考虑，假如这些要素都考虑了，依照GMP办法验证关于精蜜度的要求，同一样品进6针以上的RSD和制造6个样品的定量成果RSD都能满意小于1.5%的要求，那么这个办法用外标法便是撤底适用的，可是前面的影响要素是必定要都考虑到的，不然议论这个办法是否适用就有失偏颇了。在做过的许多出口产品的定量剖析办法傍边有许多是一些医药公司提供的比较完善而验证过的办法，内标与外标都有（他们用的都是自动进样）精蜜度都能满意RSD小于1.5%的要求，当一个办法能够满意测试要求的时分，无论内标外标，都是可行的，当然有一个剖析本钱和剖析时间的问题，内标的本钱和操控溶液、样品溶液的制造当然要比外标要高和费事一些了。而有些时分，或许受你试验室现有仪器和隶属设备的影响，达不到必定的要求，而还须进行定量剖析，有时外标的成果或许就要差一些，这时，你或许就要考虑用内标法了，能够扫除手动进样的差错、分流歧视的影响、包括一些未知要素平行差错的影响，这时内标或许就显示出它的优势来了。

2、上面已经说到当做办法验证的时分，当同一样品制造6个样品溶液用所选用的外标法进行定量的时分，RSD都满意1.5%的要求时，也分为两种情况，小于1%和大于1%小于1.5%。假如RSD的成果小于1%，那这个办法就没有什么能够怀疑的了；假如RSD的成果大于1%而在1.5%略低一些的规模活动时，这个办法的可行性就将遭到质疑，究竟这是办法验证，你就要考虑上面1所说到的影响要素的影响了，假如扫除掉以上的影响要素，RSD仍是在1.5%邻近，就要尝试内标了，假如内标成果的RSD很好，就证明你的这个办法受试验条件的影响很大，只能用内标了，或者干脆将原办法做大的变化，再尝试用外标法测试。

3、而关于微量剖析，比方农药和兽药残留的剖析、环境剖析等，依据不同的定量规范要求关于精蜜度的要求也比常量剖析的要求要宽松的多，RSD有时能够答应到达10%乃至更高，这时或许外标法有更大的使用空间。

4、单从精蜜度方面去考虑，扫除其它本钱和效率的要素，个人认为仍是内标优于外标。曾经做过一个中间体二氨基丙醇的常量定量剖析，以二乙醇胺为内标，RTX-5amine（碱改性）15m*0.32mm*1.0um色谱柱剖析，将制造好的操控溶液（含有内标物）自动进样器进6针，目的物（二氨基丙醇）与内标物（二乙醇胺）峰面积比率的RSD为0.18%，而只对这六针样品的目的物峰（二氨基丙醇）面积求RSD，成果为0.71%，通过这一实例的成果大家就会发现究竟哪个办法精蜜度更好了，当然是内标更好了。当然这个化合物的检测办法后依据上面的验证数据用内标和外标定量都是能够的，试验室能够自由挑选。但内标与外标精蜜度成果的差异是明显存在的现实。

小结

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综上所述，假如使用外标法能够满意要求的话，当然仍是外标法，究竟简略而省劲。关于精蜜度要求比较高、成果精却度会产生重大影响、试验室条件不是很理想的等等条件下，用内标法仍是必要的。但无论使用那种办法，办法的验证和承认都是很重要的，只要是依照程序通过验证和承认的办法，都有其使用的空间的。以上内容观点，仅供大家参考。